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PCR實驗室如何設計?PCR實驗室改造建設

2021-12-22 11:56:01

PCR實驗室如何設計?PCR實驗室改造建設

  PCR實驗室,即基因擴增實驗室,是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病。下面本文就來介紹一下PCR實驗室設計改造要求。

一、PCR 實驗室設計要求

  1、標準的PCR實驗室產物分析區或三個區域的最后一個區域(即擴增及產物分析區),空氣流向應由室外向室內,可通過在室內設置通風櫥、排風扇或其他排風系統達到空氣流由室外向室內流動的要求。

  2、PCR 實驗室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產物分析等三或四個區域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區域即可。各區域完全獨立分隔,不能有空氣直通。

  3、PCR實驗室各區域儀器設備配備通常如下:

  (1)標準的PCR實驗室標本制備區。儀器設備主要應有生物安全柜(最好為B2,能夠避免提取核酸在柜內反復循環,造成標本間交叉“污染”,出現假陽性結果。另外,還需要配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設備(水浴和/或干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。

  (2)標準的PCR實驗室試劑準備區。儀器設備主要應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等。可使用超凈工作臺作為試劑配制操作臺面。

  (3)標準的PCR實驗室產物分析區。本區所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。在理想情況下,PCR實驗室試劑準備、標本制備、擴增三個區域可設置緩沖間。在緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。

  (4)標準的PCR實驗室擴增區。主要儀器就是核酸擴增熱循環儀(PCR儀,實時熒光或普通的)。熱循環儀的電源應專用,并配備一個穩壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外,根據工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。

二、PCR實驗室改造建設

  1、PCR實驗室裝修緩沖室、PCR擴增區排風機向外排風,外墻及各門設有不同風量以及可調的回風口。空氣可以通過系統回風口換到一個室內。

  2、PCR實驗室改造實驗區、緩沖室頂部及傳送窗均設有紫外線燈消毒。試劑可以制備區和標本方法制備區可配備一個移動式空氣紫外線燈進行嚴格消毒。

  3、醫院中PCR實驗室不僅可以是分散式,也可以是組合式。通常完成一套PCR實驗需要經過四個過程:試劑制備、樣品數據處理、核酸擴增和產物研究分析。如果實驗過程管理需要,還應不斷增加樣品破碎過程。

  4、試劑制備和樣品制備區域為微正壓,核酸擴增室和產品分析室為微負壓,防止有核酸氣溶膠擴散污染試劑和樣品。 可以通過控制排氣量大于進氣量來實現負壓效應。

  5、在理想的條件下,可在PCR實驗室的緩沖室內設置正壓,避免室內空氣向外流出、室外空氣流入室內。

  6、若是房間深度允許,可在PCR內設置專用走廊。

  7、PCR實驗室改造的時候各區域要有一個單向進行實驗教學流程、物流、人流和氣流,形成一種單向發展過程的防護屏障,避免實驗環境干擾和實驗研究過程中核酸氣溶膠污染的假性結果。

  8、若是實驗室室內房間比較低,改造PCR實驗室時可在走廊或實驗室之外的新風機和排風機。管道應該是圓形或扁平。鋪設后,需要進行壓力和泄漏測試。接口導管和閥按照施工過程中嚴格操作,以最小化維護夾層去除的頻率。

三、PCR 實驗室建設布局

  1、實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區,不得逆向流動。各工作區域應設置緩沖間,工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區應是分隔獨立的工作室,并有明顯的標志,各區間不能直通。各區之間如果是緊密相連,需安裝物品傳遞窗。每個工作區域的頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254m,安裝數量為每20m安裝一支40W的紫外燈。

  2、PCR實驗室理想的布局應有一個專用走廊,試劑準備區、樣品制備區、擴增區和產物分析區很規范地排列在一起,前三個區各有一個緩沖間,可供換工作服和工作鞋使用,頂上可裝一紫外燈。

  3、內實驗區域設為正壓或常壓狀態,緩沖間內設為負壓狀態(可上設一抽風裝置),使這三個區的空氣流向為由實驗區域內向外,緩沖間內通向內實驗室和走廊的門可安裝一種連鎖裝置,當一個門打開時,另一門必須處于關閉狀態,防止出現兩個門同時打開的情況。

  4、產物分析區可不設緩沖間,但應設為負壓狀態(裝一個排風扇即可)、使空氣流向由外向內,以防止擴增產物的隨空氣流出。

  5、每一區域都須有明確的標記,工作按試劑準備區、樣品制備區、擴增區至產物分析區單一流向進行,各區的儀器設備包括工作服、鞋、實驗記錄本和筆等都必須專用。

  6、實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區到樣品制備區到擴增區再到擴增產物分析區,不能逆向流動。

  以上就是關于PCR實驗室設計改造要求的相關介紹,供大家參考。

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