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廣州卓平實驗室 > 行業(yè)知識 > 細胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒
凡是混入細胞培養(yǎng)箱(細胞培養(yǎng)環(huán)境)中,對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細胞持續(xù)在污染環(huán)境中生長時,輕者細胞生長緩慢,細胞分化變形,較重的細胞增殖停止,從瓶壁脫落,甚至死亡。不同的污染物對細胞的影響也有差別,有的影響是長期,緩慢和潛在的,而有的則能在很短的時間內(nèi)抑制細胞生長或產(chǎn)生有毒物質(zhì)殺害細胞。那么,細胞培養(yǎng)箱被污染怎么消毒?下面就來聊聊細胞培養(yǎng)箱消毒方法。
根據(jù)細胞培養(yǎng)箱污染源的不同,主要可以分成:生物性污染、化學(xué)性污染、物理性污染以及氣溶膠污染。
1、生物性污染:這是最常見也是危害最大的污染。比如細菌、病毒、真菌,支原體等,這些污染源有可能是人為帶入,或是細胞在放入培養(yǎng)箱前已經(jīng)受污染,又或是箱體本身沒有消毒干凈。體外培養(yǎng)的細胞自身沒有抵抗污染的能力,而培養(yǎng)基中所加抗生素的抗微生物污染的能力也是有限的,因而細胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無法挽救的。
2、化學(xué)性污染:培養(yǎng)箱中許多化學(xué)物質(zhì)都能夠引起細胞污染。比如細胞培養(yǎng)容器清洗過程中殘留的洗滌劑、加濕器中未純化的水、人為帶入的液體或氣體都可能成為化學(xué)性污染的來源。不同化學(xué)物質(zhì)對細胞污染不一樣,有的可能促進或抑制細胞生長,有的甚至?xí)䴕⑺兰毎?
3、物理性污染:培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動、輻射(紫外線或熒光)會對細胞產(chǎn)生影響。物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染,其主要是在代謝水平或分子水平上,影響細胞正常的生理過程。
4、氣溶膠污染:氣溶膠是液體或固體微粒均勻地懸浮在氣體介質(zhì)中的分散體系,當微粒是微生物時,就是微生物氣溶膠,如果這種微生物是病原性的,就是病原微生物氣溶膠。細菌、病毒等病原體通過氣溶膠可在人與人、人與環(huán)境之間傳播。微生物氣溶膠可分為兩大類:一類是飛沫核氣溶膠,另一類是粉塵氣溶膠。醫(yī)學(xué)實驗室內(nèi)許多操作都可以產(chǎn)生氣溶膠,并且大多可能是病原微生物形成的感染性氣溶膠,由于其氣溶膠分子小,漂浮在空氣中、粘附于人身上,易在空氣中擴散而污染實驗室的空氣。
1、培養(yǎng)箱消毒:先用純水擦洗,接著用95的酒精擦洗,再照紫外就可以了。
2、方法比較簡單,先用75%酒精擦拭內(nèi)壁,通風(fēng)10分鐘,紫外線照射30分鐘即可。
3、通常用70%的乙醇擦洗,然后再用0、1%的新潔爾滅擦洗,不放心的話再用高錳酸鉀加甲醛1:1比例熏一遍、注意要是熏的話千萬注意混合之后馬上離開,然后密閉細胞培養(yǎng)室,味道很刺激的、在養(yǎng)細胞前消毒,否則,確實沒地方放細胞、
4、通常處理方法是先用75%的酒精擦拭內(nèi)壁,接著用甲醛高錳酸鉀熏蒸一個晚上,再通風(fēng)一整天(同時打開紫外線照射)。
5、熏蒸后吹一天是不夠的,起碼要一個星期才可以讓甲醛散盡,要不細胞長不好的。
6、有的培養(yǎng)箱能加熱內(nèi)壁到90度,也有的帶有紫外線功能、常規(guī)應(yīng)該每周用酒精擦洗內(nèi)部一次、具體的操作請參考培養(yǎng)箱的手冊,或著咨詢培養(yǎng)箱技術(shù)支持、使用消毒劑應(yīng)小心,培養(yǎng)箱內(nèi)有檢測溫度、濕度和二氧化碳濃度的傳感器,腐蝕性消毒劑或有機溶劑有可能損壞某些器件,請慎用、另外,揮發(fā)性的甲醛有毒,易燃、易爆、如果在培養(yǎng)箱內(nèi)殘留甲醛的話,細胞會死光光哦、總之,先看培養(yǎng)箱手冊,再聯(lián)系技術(shù)支持,方可萬無一失啊、
7、常規(guī)什么也不放!硫酸銅的作用是抑制細菌生長(但多數(shù)用在處理污染的孔板)、因為現(xiàn)在的孵箱都有抑菌功能。
8、在補充水時把水加熱一下,達到培養(yǎng)箱的溫度。
9、實驗室的做法:把平皿高壓滅菌后,在無菌操作臺內(nèi)加入適量的滅菌雙蒸水或者生理鹽水、再加少量新潔爾滅,濃度沒關(guān)系、細胞養(yǎng)的都可以。
10、把培養(yǎng)箱里的板層拿出來高壓一下,箱壁用75%酒精擦一遍,換用詩樂氏擦一遍,再紫外照一夜,效果很好。
細菌培養(yǎng)箱中的水盤里出現(xiàn)霉菌,有一種方法可以在不移除細胞的情況下能夠消滅培養(yǎng)箱中的霉菌,已經(jīng)長出霉菌,建議把所有細胞移出到其他培養(yǎng)箱。將這個培養(yǎng)箱全面消毒,噴酒精,紫外滅菌至少1個小時。因為我們組細胞染過菌,一旦培養(yǎng)箱不潔凈,會導(dǎo)致所有培養(yǎng)細胞都要染菌的,爆發(fā)以后很可怕。培養(yǎng)箱出現(xiàn)霉菌很可能是水槽的水不夠潔凈,一定要用超凈水超純水來填充水槽,避免霉菌生長。要定期更換水槽中的純水。一個月左右換一次。一個季度到半年要培養(yǎng)箱徹底滅菌一次。
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