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廣州卓平實驗室 > 行業知識 > 細胞實驗室操作規程注意事項
細胞實驗室是進行細胞操作的實驗室,通常會做細胞操作、細胞培養、細胞分離、細胞檢測等。細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。
細胞實驗室按功能分區可分成:潔凈區、非潔凈區。
潔凈區:更衣區、緩沖區、細胞制備區、細胞培養區;配液區、微生物檢測區。
非潔凈區:樣本接收區、免疫檢測區、細胞生物學檢測區、理化檢測區、物料存放區;清洗消毒區、氣體儲存區、信息中心區、細胞儲存區、檔案存放區。
►細胞收集(抽血)
1、實驗室負責人需提前1天接到抽血具體時間的通知,準備工作相關事宜。
2、工作前實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌30分鐘。
3、潔凈室內操作人員清潔后提前20分鐘穿戴無菌服帽、口罩,無菌手套等,進入潔凈室,做好工作前準備。
4、抽血前10分鐘由實驗室專門人員穿戴整齊攜帶滅菌后的無孔消毒盤進入治療室,等待抽血,仔細閱讀知情同意書并在知情同意書上簽字。
5、將剛抽取的血液放入滅菌后的無孔消毒盤中迅速送到實驗室傳遞窗,潔凈室內操作人員將血液從傳遞窗取出運送至操作室對細胞進行收集。
6、實驗結束打掃完畢后,再次將實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌15分鐘。
►細胞培養
1、根據治療方案確定好細胞培養計劃。
2、細胞培養期間,需要每天觀察細胞生長狀態,并及時做好相關培養工作。
3、細胞培養時間大概是15天,如果發現因細胞生長等原因需要延長培養時間,要及時通知上級領導,通常回輸時間不能提前。
4、在回輸或凍存前需完成細胞質量控制,對細胞進行無菌檢測和細胞數量活率檢測。
5、若是因患者自身或其它原因,需要延遲回輸,及時將細胞凍存。
6、培養過程要嚴格遵守無菌室相關規章制度和操作方法:
①工作前實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌30分鐘。
②潔凈室內操作人員清洗后,需穿戴無菌服帽、口罩,無菌手套方可進入潔凈室,無菌手套操作前需用75%酒精紗布擦拭。
③實驗所使用器械器具要事先滅菌,使用的吸管,滴管,試管,培養瓶等要確保無塵無菌。
④點燃酒精燈時,避免超凈臺中放置過多物品。
⑤打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵。
⑥打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經火焰燒灼。
⑦同一根吸管或滴管不能連續用于幾個不同的細胞系。
⑧吸取培養基的吸管應離開培養瓶或試管口0、5cm,避免伸入培養瓶口或試管口。以防止細胞系的互相混雜污染。⑨漏在培養瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。
⑩實驗結束后,再次將實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌15分鐘。
►細胞回輸
1、實驗室負責人需提前1天接到回輸具體時間通知,準備工作相關事宜。 2、工作前實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌30分鐘。 3、實驗室內由至少2人確認所需回輸的細胞和放置位置。
3、潔凈室內操作人員清潔后應在回輸時間提前1小時穿戴好無菌服帽、口罩,無菌手套等,進入潔凈室,做好工作前準備。
4、若是需要取出凍存細胞,潔凈室外工作人員穿戴整齊將所需細胞從液氮罐取出并迅速放入傳遞窗,潔凈室內操作人員立即對細胞進行復蘇。
5、將細胞放入細胞袋前再次對細胞進行鏡檢,觀察細胞活性和數量、確保回輸細胞的安全有效,同時留取一小部分放入微生物培養皿中。
6、將裝有細胞的細胞袋做好相關標記后放入滅菌后的無孔消毒盤內,并連同細胞質控表一同放入傳遞窗,由潔凈室外工作人員穿戴整齊后送入治療室交于相關人員。
7、放入回輸細胞的微生物培養皿需要做好標記,并放入培養箱中,繼續觀察15天,若是發現異常要立即報告。
8、實驗結束打掃完畢后,再次將實驗室超凈臺、傳遞窗和整體環境紫外滅菌15分鐘。
以上就是關于細胞實驗室使用注意事項的相關介紹,供大家參考。
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